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使用可見分光光度計(jì)應(yīng)注意的幾個(gè)問題

時(shí)間 : 2021-10-22 14:17:52 閱讀 : 98
如何選擇適合你的可見分光光度計(jì)一般來說,我們主要考慮光學(xué)結(jié)構(gòu)、光譜范圍、帶寬、樣品類型和分析工具。以下是根據(jù)這五個(gè)方面對(duì)可見分光光度計(jì)的簡(jiǎn)要說明。

是光學(xué)結(jié)構(gòu)。根據(jù)結(jié)構(gòu),分光光度計(jì)一般可分為單光束分光光度計(jì)和雙光束分光光度計(jì)。什么是單光束分光光度計(jì),顧名思義,單光束分光光度計(jì)主要依靠單光束進(jìn)行測(cè)量。通過使給定波長(zhǎng)的光束穿過對(duì)照物質(zhì),然后穿過實(shí)際樣品溶液,可以獲得光吸收結(jié)果。雙光束分光光度計(jì)一般通過光斬波輪將一束光分成兩束,即分別為測(cè)量對(duì)照樣品和實(shí)際樣品,可以減少光漂移和測(cè)量倍。然而,一些雙光光度計(jì)不使用斬波器輪,而是使用光束分光器將光束分成兩個(gè)平行光束,然后同時(shí)將對(duì)照樣品和目標(biāo)樣品分開。由于測(cè)量的速度增加,雙光束分光光度計(jì)在研究測(cè)量中某些溶液隨時(shí)間的動(dòng)態(tài)變化時(shí)非常有用。

第二個(gè)是光譜范圍。普通用戶認(rèn)為儀器需要更大的靈活性,因此他們必須選擇性能更高的寬頻譜儀器。紫外分光光度計(jì)通常覆蓋190納米和380納米波長(zhǎng),通常由氘燈照明。一些特殊的儀器可以提供滿足光子學(xué)和半導(dǎo)體研究需要的光譜范圍。這些儀器有多種光源可供選擇:紫外光、可見光甚至紅外光(780納米至3000納米)。鎢絲燈和鹵素?zé)敉ǔV桓采w可見光(約380納米至800納米)。氙燈可以覆蓋紫外線和可見光區(qū)域。

后跟帶寬。可見分光光度計(jì)的帶寬很大程度上取決于單色儀狹縫的寬度。調(diào)節(jié)狹縫的寬度可以選擇投射實(shí)驗(yàn)所需的光譜。嚴(yán)格的帶寬使儀器能夠以高分辨率吸收測(cè)量的光,適用于復(fù)雜的混合物。可變單色儀的狹縫寬度可以使分光光度計(jì)滿足各種實(shí)驗(yàn)要求。分光光度計(jì)制造商通常使用光電倍增管和光電二極管,吸光度值為測(cè)量。光電倍增管可以提供快速的反應(yīng)時(shí)間和良好的靈敏度,并且可以調(diào)節(jié)到紫外光譜中的特定范圍。然而,一些制造商更依賴光電二極管的動(dòng)態(tài)范圍,在幾秒鐘內(nèi)完成所有光譜測(cè)量。

還有樣本類型。在大多數(shù)樣品類型中,分光光度計(jì)可以接受樣品池、小玻璃管、移液管和微孔板。微孔板主要滿足高通量和大規(guī)模實(shí)驗(yàn)室的需求。然而,盡管對(duì)于小型實(shí)驗(yàn)室,制造商仍然提供各種集裝箱轉(zhuǎn)換器,以滿足吞吐量要求并減少實(shí)驗(yàn)時(shí)間。小試管裝載樣品的容量通常為1 μ L至5 mL,約儀器配備有各種樣品夾具以滿足各種變化。它表現(xiàn)出很強(qiáng)的環(huán)境適應(yīng)性。

is分析工具之后。大多數(shù)獨(dú)立分光光度計(jì)包含驅(qū)動(dòng)儀器運(yùn)行和管理數(shù)據(jù)的軟件。高性能儀器通常與電腦一起使用,需要制造商提供額外的軟件。同時(shí),用戶也可以選擇升級(jí)軟件來滿足他們的需求。另一個(gè)值得考慮的因素是數(shù)據(jù)的z終用途。每個(gè)獨(dú)立的實(shí)驗(yàn)室都有自己感興趣的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,并有不同的選擇。所以這也是需要考慮的一點(diǎn)。

以下是使用可見分光光度計(jì)時(shí)應(yīng)注意的一些問題。

在使用分光光度計(jì)的過程中有幾點(diǎn)需要注意:

1)試管架和試管在使用中的正確定位。一些用戶對(duì)此問題關(guān)注不夠,操作不當(dāng)導(dǎo)致的意外錯(cuò)誤嚴(yán)重影響了分析的結(jié)果。 先,試管不應(yīng)該傾斜。輕微的傾斜會(huì)導(dǎo)致參考樣品和待測(cè)樣品的吸收光程長(zhǎng)度不一致,也可能導(dǎo)致入射光不能完全穿過樣品池,導(dǎo)致測(cè)試比精度達(dá)不到要求。其次,試管架應(yīng)該在每次測(cè)試中被推和拉到位。如果不在適當(dāng)?shù)奈恢茫鼘⒂绊憸y(cè)試值的重復(fù)性準(zhǔn)確性。之后,還應(yīng)確保試管的清潔度,以延長(zhǎng)其使用壽命。

2)干燥劑的使用。干燥劑故障將導(dǎo)致a)數(shù)字顯示不穩(wěn)定,無法調(diào)節(jié)“0”點(diǎn)或“ ”點(diǎn)(電路或光電池受到潮濕影響)。鏡子會(huì)發(fā)霉或被污染,這會(huì)影響光效率并增加雜散光。鑒于上述原因,分光光度計(jì)應(yīng)放置在遠(yuǎn)離高濕度的地方,如水池,干燥劑應(yīng)定期更換或烘烤。

3)儀器工作環(huán)境。應(yīng)避免陽光直射,避免強(qiáng)電場(chǎng),避免與功率較高的電氣設(shè)備共用電源,避免腐蝕性氣體等。

4)試管不能用堿性溶液或強(qiáng)氧化性洗滌液清洗,也不能用刷子清洗。附著在試管外壁上的水或溶液應(yīng)使用鏡面紙或薄而軟的吸水紙吸干,不得擦拭以避免損壞其光學(xué)表面。

5)為防止光電管疲勞,在不在測(cè)定時(shí)打開樣品室蓋,切斷光路,延長(zhǎng)光電管的使用壽命。

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